iFluor 488-PEG12-dUTP，iFluor 488-聚乙二醇 12-脱氧尿苷三磷酸-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安球赛在线直播平台生物

iFluor 488-PEG12-dUTP（iFluor 488-聚乙二醇 12-脱氧尿苷三磷酸，iFluor 488-PEG12-2'-dUTP，5-iFluor 488-PEG12-dUTP）是一种经PEG12（十二聚乙二醇）长链间隔臂修饰的荧光标记脱氧核苷酸，由iFluor 488荧光染料、PEG12亲水连接臂和dUTP三磷酸核苷三部分组成。激发波长491 nm，发射波长516 nm，分子量约1457.28，外观为绿色固体，-20°C避光保存。

与直接标记的dUTP（如Alexa Fluor 488-dUTP）相比，PEG12间隔臂的引入解决了一个长期困扰荧光原位杂交（FISH）领域的核心问题——空间位阻。当荧光染料直接连接在dUTP的5位上时，染料分子紧贴DNA双螺旋的大沟，不仅会干扰DNA聚合酶的识别与催化，还会导致杂交后荧光信号因染料-碱基堆叠淬灭而大幅降低。PEG12链由12个乙二醇单元组成，长度约4.5 nm，足以将iFluor 488推离DNA主链，使其处于自由旋转状态，从而恢复接近游离染料的量子产率。

在酶促标记（Nick Translation、Random Priming、PCR标记）中，iFluor 488-PEG12-dUTP的掺入效率与天然dTTP高度接近。以Nick Translation为例，DNase I在DNA上产生随机切口，DNA Pol I同时执行5'→3'外切和聚合反应，将iFluor 488-PEG12-dUTP逐个掺入替换dTTP。由于PEG12的柔性和亲水性，该修饰核苷酸不会显著改变DNA的Tm值，通常仅降低1–2°C，这意味着杂交条件几乎无需调整。

在FISH实验中，使用该试剂标记的探针在 stringent wash（如0.1× SSC, 65°C）条件下仍能保持强信号，背景*低。这得益于PEG链的抗非特异性吸附特性——PEG化表面能有效抵抗蛋白质和其他生物分子的非特异性结合，从而显著降低探针与非靶标序列之间的假阳性信号。

操作建议：酶促标记时，iFluor 488-PEG12-dUTP与dTTP的摩尔比建议为1:3至1:1，过高比例会抑制酶活性。标记完成后用G-50凝胶柱或乙醇沉淀纯化，去除未掺入的游离染料。探针浓度通常调整至10–50 ng/μL用于杂交。

该试剂特别适合制备高灵敏度FISH探针、CGH（比较基因组杂交）探针、以及芯片实验室（Lab-on-a-chip）中的微流控核酸检测探针，是现代细胞遗传学和基因组学研究中高性能荧光核苷酸的代表。

iFluor 488-PEG12-dUTP

产地：西安

供应商：西安球赛在线直播平台生物科技有限公司

纯度：99%

用途：仅用于科研

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！

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