中文名:MSU440发根农杆菌
英文名:MSU440 Agrobacterium
植物遗传转化中,大质粒的导入效率一直是制约实验成功率的瓶颈。MSU440发根农杆菌电击感受态细胞,基因型为Agrobacterium rhizogenes(strR)MSU440 Ri(农杆碱型),是专为大质粒电转化而优化的感受态产品。与常用的GV3101、EHA105等菌株相比,MSU440在大质粒转化上展现出压倒性优势。
MSU440含有农杆碱型Ri质粒,宿主范围*广,可感染玉米、烟草、茶树、青蒿等多种双子叶植物及部分单子叶植物。其链霉素抗性标记便于筛选。经实测,用11633 bp的pCAMBIA2301质粒检测,MSU440的转化效率超过10⁵ cfu/μg DNA;而面对40 kb的大质粒pCAMBIA2301-ZH时,转化效率仍可达5×10³ cfu/μg DNA。质粒增大一倍,转化效率仅下降一个数量级——这一表现在农杆菌感受态中实属罕见。
电转化操作需严格控制参数。推荐使用0.1 cm电击杯,设置C=25 μF、PC=200 Ω、V=2400 V。感受态从-80°C取出后需在冰中融化5分钟,加入0.01–1 μg质粒DNA(体积不超过感受态的1/10),用手指快速拨打管底混匀后立即冰浴,再转入电击杯。电击完成后迅速加入1 mL无抗生素TY培养基,28°C振荡培养2–3小时恢复,再涂布于含相应抗生素的TY平板。关键注意事项:MSU440具有卡那霉素抗性,不可用于含卡那霉素抗性质粒的转化;质粒不纯或含乙醇等有机物会导致转化效率急剧下降。
TY培养基配方(1L):胰蛋白胨5g、酵母提取物3g,补水定容后121°C灭菌20分钟,每升加入10 mL无菌1M CaCl₂。固体培养基另加15g琼脂粉。MSU440感受态保存于-80°C,是植物分子生物学、次生代谢工程、毛状根培养等研究中大片段DNA导入的理想工具。

产地:西安
供应商:西安球赛在线直播平台 生物科技有限公司
纯度:99%
用途:仅用于科研
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!
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