中文名:iFluor647-环辛炔
英文名:iFluor 647 TCO
iFluor 647 TCO(iFluor647-环辛炔,iF647-TCO,iFluor 647-反式环辛烯) 是一种将远红色荧光染料iFluor 647与高张力反式环辛烯(TCO)基团通过线性PEG连接臂共价偶联而成的近红外生物正交标记探针。其激发波长为656 nm,发射波长为670 nm,量子产率达0.25,分子量约1181.33。该探针的核心价值在于:它能与四嗪(Tetrazine)基团发生逆电子需求狄尔斯-阿尔德(IEDDA)点击化学反应,反应速率*快(二阶速率常数可达10³–10⁶ M⁻¹s⁻¹),且完全无需金属铜催化剂。
在活体深层组织成像领域,iFluor 647 TCO展现出无可替代的优势。665–670 nm的远红光波段处于生物组织的"光学窗口",该波段下血红蛋白和水的吸收系数*低,组织散射也大幅减弱。这意味着荧光信号能穿透数毫米甚至厘米级的组织深度,同时生物样本在此波段几乎不产生自发荧光,背景噪声被压至*低水平。相较于传统的Cy5染料,iFluor 647的光稳定性显著更优,抗光漂白能力强,适合长达数小时的连续追踪实验。
从化学反应机制来看,TCO基团的环张力是其高反应活性的根源。反式环辛烯的环张力约为18 kcal/mol,这使其与四嗪的环加成反应在热力学上高度有利,动力学上也极为迅速。更关键的是,该反应对氨基酸、核苷酸、糖类等常见生物分子完全无交叉反应,在细胞培养基中反应效率超过95%,即使在血清存在下反应速率降低也不到20%。不过需要注意,还原剂(如DTT、β-巯基乙醇)会显著抑制反应,而Ca²⁺、Mg²⁺、Zn²⁺等金属离子则无显著影响。
在实验操作层面,iFluor 647 TCO溶于DMSO,需-20°C干燥避光保存,纯度95%以上。使用时应先以DMSO预溶,再逐步稀释至水性缓冲液,避免直接加入水相体系导致沉淀。标记时TCO与四嗪的摩尔比建议控制在1:1至1:2之间,反应体系pH维持在7–8以获得*佳效率。标记完成后需用缓冲液充分洗涤,去除未结合探针,以消除非特异性荧光干扰。
该探针已被广泛应用于活细胞表面受体的动态迁移追踪、小鼠肿瘤模型中抗体标记的药物递送路径分析、以及STED和STORM等超高分辨率显微成像中。其光谱与DAPI、FITC、TRITC、Cy3等常规荧光探针完全分离,是多色荧光panel设计和高维流式细胞术的理想近红外通道选择。可以说,iFluor 647 TCO以"无铜、快速、深层、低背景"四重优势,正在重新定义活体分子成像的技术边界。

产地:西安
供应商:西安球赛在线直播平台 生物科技有限公司
纯度:99%
用途:仅用于科研
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!
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