SPDP，N-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶基二硫)丙酸酯，CAS 68181-17-9-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安球赛在线直播平台生物

在蛋白质化学与生物偶联技术领域，SPDP（N-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶基二硫)丙酸酯，CAS 68181-17-9）是一种经典的异双功能可裂解交联试剂。其分子结构中包含三个关键功能域：NHS酯端用于与伯胺反应，二硫键桥提供可控断裂位点，吡啶基二硫端则用于与游离巯基进行二硫交换。这种"胺端-二硫键-硫醇端"的三明治架构使SPDP成为构建可逆生物偶联物的首选工具。

从反应机理来看，SPDP与蛋白质的偶联分两步进行。第一步，NHS酯在pH 7.2-8.5的弱碱性条件下与蛋白质表面赖氨酸残基的ε-氨基反应，形成稳定的酰胺键，同时释放N-羟基琥珀酰亚胺。这一步的反应速率常数约为10⁻² M⁻¹s⁻¹，属于中等活性，既保证了偶联效率，又避免了过度修饰导致的蛋白质失活。第二步，引入的吡啶基二硫基团可与另一蛋白质或小分子上的游离半胱氨酸巯基发生二硫交换反应，生成新的二硫键并释放2-巯基吡啶。2-巯基吡啶在343 nm处有特征吸收峰，这一性质被广泛用于定量测定偶联效率。

SPDP相较于其他交联试剂（如SMPB、SATA）的核心优势在于其二硫键的可裂解性。在还原性环境中（如含10 mM DTT或5 mM TCEP的缓冲液），连接两个生物分子的二硫键可被选择性断裂，实现偶联物的精确解离。这一特性在蛋白质相互作用研究中极为关键——研究者可以先用SPDP交联蛋白质复合物，再通过还原处理释放各组分，进而分别进行质谱鉴定或功能分析。

在实际操作中，SPDP的使用需注意几个关键参数。首先，NHS酯在水溶液中的半衰期约为4-6小时（pH 7.4），因此需现配现用。其次，偶联反应的pH控制至关重要——pH过高会导致NHS酯水解，pH过低则氨基质子化失去亲核性。*优反应pH为7.5-8.0。此外，SPDP在DMSO中溶解后应立即使用，长期储存会导致NHS酯自水解，纯度下降。

从应用场景来看，SPDP不仅用于蛋白质-蛋白质交联，还广泛应用于抗体-药物偶联物（ADC）的模拟构建、蛋白质固定化以及表面等离子共振（SPR）实验中的配体制备。其吡啶基二硫端提供的紫外检测功能，使反应过程可实时监控，这是许多不可裂解交联剂所不具备的优势。

SPDP

产地：西安

供应商：西安球赛在线直播平台生物科技有限公司

纯度：99%

用途：仅用于科研

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！

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