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可见光荧光染料偶联DPPC磷脂定制(细胞标记专用)
发布时间:2026-05-22     作者:kx   分享到:

一、定制服务核心内容

西安球赛在线直播平台 生物专注可见光荧光染料-DPPC 磷脂定向偶联定制,聚焦细胞水平膜标记、脂质体示踪、膜动力学研究等场景,提供从分子设计、合成偶联到纯化表征的全流程服务,产品具备高纯度、高标记效率、良好生物相容性,可直接用于细胞成像与功能实验。

(一)核心骨架:DPPC 磷脂(二棕榈酰磷脂酰胆碱)

• 结构特性:饱和 C16 烷基链,相变温度 41℃,常温下呈凝胶态,细胞膜高同源性,易嵌入脂质双层,稳定性强。

• 应用适配:标准细胞培养温度(37℃)下膜结构稳定,适配活细胞长期标记、膜流动性分析、脂质体组装等实验。

• 纯度保障:自研合成,纯度≥95%,批次一致性高,无内毒素,满足细胞实验无毒性要求。

(二)可见光荧光染料体系(激发 / 发射 400–650 nm)

精选高量子产率、光稳定性优、低细胞毒性的可见光染料,适配普通荧光显微镜、共聚焦显微镜,覆盖多色标记需求:

1. FITC(荧光素):Ex/Em=495/520 nm(绿色),水溶性好,膜穿透性强,适用于活细胞膜染色、内吞示踪、脂质体共定位。

2. Rhodamine B(罗丹明 B):Ex/Em=555/580 nm(橙红色),量子产率高,*光漂白性优于 FITC,适配固定 / 活细胞标记、膜融合监测。

3. TRITC(四甲基罗丹明):Ex/Em=550/570 nm(红色),背景荧光低,适配多色共聚焦成像、与绿色染料配对双标记。

4. BODIPY 系列:Ex/Em=500–550 nm(可调),窄发射峰、高荧光亮度,适合长期动态追踪、脂质滴标记。

5. NBD(7 - 硝基苯 - 2 - 氧杂 - 1,3 - 二唑):Ex/Em=470/530 nm(黄绿色),膜环境敏感,适配膜*性、流动性定量分析。

(三)偶联技术与结构定制

1. 偶联策略(高特异性、低副反应)

○ 氨基偶联:DPPC 头部氨基与染料 NHS 酯共价结合,稳定不可逆,标记效率≥90%。

○ PEG 连接臂偶联:可选 PEG1000/2000/5000,提升水溶性、降低非特异性吸附,适配体内外长循环标记。

○ 点击化学偶联:叠氮 - 炔基 / DBCO 无铜点击,条件温和(室温、pH 中性),保护细胞活性,适配敏感染料偶联。

2. 定制化参数

○ 染料标记比例:1:1–1:5(染料:DPPC),按需调控荧光强度与膜嵌入能力。

○ 官能团拓展:可叠加生物素、叶酸、靶向肽等,实现 “荧光标记 + 靶向” 双功能。

○ 纯度分级:细胞级(≥98%)、科研级(≥95%),配套 HPLC、MS、NMR 表征报告。

(四)核心应用场景

• 活细胞膜动态标记、膜流动性 / 通透性检测。

• 脂质体 / 纳米载体细胞内吞、转运、分布示踪。

• 细胞凋亡、自噬、膜融合过程可视化监测。

• 多色共聚焦成像、免疫荧光共定位实验。

定制服务核心内容



二、定制案例展示

案例 1:BODIPY-DPPC(细胞脂质滴长期追踪)

• 定制需求:高亮度可见光荧光 DPPC,用于活细胞脂质滴动态追踪,要求窄发射峰、低背景干扰。

BODIPY-DPPC(细胞脂质滴长期追踪)

案例 2:NBD-DPPC(细胞膜流动性定量分析)

• 定制需求:环境敏感型荧光 DPPC,用于检测细胞膜流动性变化,要求荧光强度随膜*性动态响应。

NBD-DPPC(细胞膜流动性定量分析)


三、高分文献摘抄及翻译

文献一(膜标记领域顶刊,IF=8.2,Colloids and Surfaces B: Biointerfaces,2024)

英文原文:

Fluorescently labeled phospholipids have become indispensable tools for studying cell membrane dynamics and lipid trafficking. In this study, we synthesized a series of visible light dye-conjugated DPPC derivatives (FITC-DPPC, Rhodamine B-DPPC) via NHS ester-mediated amide coupling. The products were purified by high-performance liquid chromatography (HPLC) and characterized by mass spectrometry (MS) and nuclear magnetic resonance (NMR). Cellular experiments showed that these conjugates exhibited excellent biocompatibility, with no significant cytotoxicity at working concentrations (1–5 μM). Fluorescence microscopy analysis revealed that FITC-DPPC and Rhodamine B-DPPC could efficiently insert into the plasma membrane of HeLa cells, showing uniform and stable fluorescence signals without internalization into the cytoplasm. Time-lapse imaging confirmed that the conjugates could maintain stable fluorescence for more than 48 h, enabling long-term monitoring of membrane dynamics. This work provides a reliable strategy for the design and synthesis of visible light-labeled phospholipids, which can be widely applied in cell biology and drug delivery research.

中文翻译:

荧光标记磷脂已成为研究细胞膜动力学与脂质转运不可或缺的工具。本研究通过 NHS 酯介导的酰胺偶联反应,合成了一系列可见光染料偶联的 DPPC 衍生物(FITC-DPPC、罗丹明 B-DPPC)。产物经高效液相色谱(HPLC)纯化,并通过质谱(MS)与核磁共振(NMR)进行结构表征。细胞实验结果表明,该类偶联物生物相容性良好,在工作浓度(1–5 μM)下无明显细胞毒性。荧光显微镜分析显示,FITC-DPPC 与罗丹明 B-DPPC 可高效嵌入 HeLa 细胞质膜,荧光信号均匀稳定,且不会内化至细胞质中。延时成像实验证实,该偶联物可维持稳定荧光超过 48 小时,实现细胞膜动力学的长期监测。本研究为可见光标记磷脂的设计与合成提供了可靠策略,可广泛应用于细胞生物学与药物递送研究领域。


文献二(脂质体成像领域顶刊,IF=11.4,Journal of Controlled Release,2023)

英文原文:

Lipid-based nanoparticles, such as liposomes, have emerged as promising carriers for drug delivery and imaging. Fluorescent labeling of phospholipids is critical for tracking the intracellular fate and biodistribution of liposomes. Herein, we report the synthesis and biological evaluation of BODIPY-conjugated DPPC (BODIPY-DPPC) for long-term tracking of liposomes in living cells. BODIPY-DPPC was synthesized via copper-free click chemistry between azide-modified DPPC and alkyne-functionalized BODIPY, which avoids the cytotoxicity induced by copper ions. The resulting BODIPY-DPPC exhibited high fluorescence quantum yield (Φ=0.85) and excellent photostability. Liposomes containing BODIPY-DPPC were prepared and incubated with MCF-7 cells. Confocal laser scanning microscopy (CLSM) results showed that the liposomes could be efficiently internalized into MCF-7 cells, and the fluorescence signal of BODIPY-DPPC could be clearly observed in the cytoplasm for up to 72 h. Flow cytometry analysis confirmed that the cellular uptake efficiency of BODIPY-DPPC-labeled liposomes was comparable to that of unlabeled liposomes, indicating that fluorescent labeling did not affect the biological properties of liposomes. This study demonstrates that BODIPY-DPPC is a powerful tool for long-term tracking of liposomes in living cells and provides a valuable reference for the development of fluorescently labeled phospholipids.

中文翻译:

脂质体等脂质基纳米颗粒已成为药物递送与成像领域的理想载体。磷脂荧光标记对于追踪脂质体的细胞内命运与生物分布至关重要。本文报道了用于活细胞内脂质体长期追踪的 BODIPY 偶联 DPPC(BODIPY-DPPC)的合成及生物学评价。通过叠氮修饰 DPPC 与炔基功能化 BODIPY 之间的无铜点击化学合成 BODIPY-DPPC,避免了铜离子诱导的细胞毒性。所得 BODIPY-DPPC 荧光量子产率高(Φ=0.85)且光稳定性良好。制备含 BODIPY-DPPC 的脂质体并与 MCF-7 细胞共孵育,共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)结果显示,脂质体可被 MCF-7 细胞高效内吞,且 BODIPY-DPPC 的荧光信号在细胞质中可清晰观察长达 72 小时。流式细胞术分析证实,BODIPY-DPPC 标记脂质体的细胞摄取效率与未标记脂质体相当,表明荧光标记不影响脂质体的生物学特性。本研究证实 BODIPY-DPPC 是活细胞内脂质体长期追踪的有力工具,为荧光标记磷脂的开发提供了重要参考。


四、参考文献

1. Li X, et al. Preparation and in vitro imaging performance of fluorescent labeled phospholipid liposomes. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, 2024, 237: 113689.(FITC-DPPC 细胞成像应用)

2. Zhang H, et al. Synthesis of Rhodamine B labeled phospholipids and their application in cell membrane labeling. Dyes and Pigments, 2023, 216: 111345.(罗丹明 B-DPPC 合成与膜标记)

3. Chen L, et al. BODIPY-labeled phospholipids for long-term tracking of lipid droplets in live cells. Analytica Chimica Acta, 2023, 1268: 341322.(BODIPY-DPPC 脂质滴追踪)

4. Liu S, et al. NBD-labeled phospholipids: Tools for studying membrane dynamics and phospholipid transport. Chemistry and Physics of Lipids, 2022, 256: 105892.(NBD-DPPC 膜动力学研究)

5. Wang Y, et al. In vivo tumor-targeted imaging of near-infrared CY7-labeled PEG-phospholipid nanocarriers. Journal of Nanoparticle Research, 2024, 26 (5): 145.(荧光磷脂体内成像参考)

6. Panchuk-Voloshina N, et al. Alexa dyes, a new generation of fluorescent dyes for biological imaging. J Histochem Cytochem, 1999, 47 (11): 1473-1480.(荧光染料标记核心技术)

7. Grimm J B, et al. General synthetic method for Si-fluoresceins and Si-rhodamines. Nature Methods, 2017, 14 (5): 461-467.(荧光染料合成技术参考)

8. 张敏,李娟,王浩. DSPE-PEG-FITC 的合成及其在脂质体示踪中的应用。生物医学工程学杂志,2022, 39 (2): 321-327.(荧光磷脂脂质体示踪应用)

9. Li J, Zhang H, Wang Y. pH and redox dual-responsive DSPE-SS-PEG-DMMA for targeted drug delivery in cancer therapy. Journal of Nanomaterials, 2023, 2023: 1-12.(刺激响应型荧光磷脂参考)
10. 刘洋,王紫安,蒋逸飞,等。近红外二区荧光 / 光声双模态成像脂质体的制备与表征。中国药科大学学报,2019, 50 (5): 560-564.(荧光磷脂脂质体制备参考)

10. 单玲玲,高贵珍,曹稳根。靶向肿瘤药物传递系统的制备与表征。宿州学院学报,2014, 12: 27-30.(靶向荧光磷脂应用参考)


五、定制产品列表

产品名称

染料类型

激发 / 发射波长(nm)

连接臂

应用场景

FITC-DPPC

FITC(绿色)

495/520

无 / PEG2000

活细胞膜标记、内吞示踪

Rhodamine B-DPPC

罗丹明 B(橙红)

555/580

无 / PEG2000

细胞膜染色、脂质体共定位

TRITC-DPPC

TRITC(红色)

550/570

无 / PEG2000

多色共聚焦成像、双标记实验

BODIPY 500/510-DPPC

BODIPY(绿色)

500/510

无 / PEG2000

脂质滴追踪、长期动态成像

BODIPY 530/550-DPPC

BODIPY(黄绿)

530/550

无 / PEG2000

膜融合监测、多色成像

NBD-DPPC

NBD(黄绿)

470/530

膜流动性、*性定量分析

FITC-PEG1000-DPPC

FITC(绿色)

495/520

PEG1000

水溶性提升、长循环标记

Rhodamine B-PEG2000-DPPC

罗丹明 B(橙红)

555/580

PEG2000

低非特异性吸附、细胞内示踪

TRITC-PEG5000-DPPC

TRITC(红色)

550/570

PEG5000

体内外长循环、靶向递送示踪

BODIPY-PEG2000-DPPC

BODIPY(黄绿)

530/550

PEG2000

脂质体体内外追踪、稳定性提升

生物素-FITC-DPPC

FITC(绿色)

495/520

荧光标记 + 生物素双功能、靶向富集

叶酸-Rhodamine B-DPPC

罗丹明 B(橙红)

555/580

PEG2000

肿瘤靶向 + 荧光示踪、癌细胞标记

叠氮-FITC-DPPC

FITC(绿色)

495/520

点击化学二次偶联、多功能标记

炔基-TRITC-DPPC

TRITC(红色)

550/570

无铜点击偶联、敏感体系标记

DBCO-BODIPY-DPPC

BODIPY(黄绿)

530/550

PEG2000

无铜点击靶向修饰、活体成像

FITC-DPPC(高标记率)

FITC(绿色)

495/520

高荧光强度、低浓度标记

Rhodamine B-DPPC(低光漂白)

罗丹明 B(橙红)

555/580

长时间成像、*光漂白需求

BODIPY-DPPC(无内毒素)

BODIPY(黄绿)

530/550

PEG2000

细胞 / 活体实验、无毒性要求

NBD-DPPC(高灵敏度)

NBD(黄绿)

470/530

膜*性微小变化检测、定量分析

多色混合标记 DPPC

FITC/Rhodamine B

495/520、555/580

PEG2000

多色共定位、多靶点同时标记

 


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