中文名:二苯并环辛炔-四聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺酯
英文名:DBCO-PEG4-NHS Ester
在蛋白质与多肽的化学修饰领域,氨基标记是使用频率*高的反应类型之一。DBCO-PEG4-NHS Ester(二苯并环辛炔-四聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺酯),别名DBCO-PEG4-NHS与Dibenzocyclooctyne-PEG4-NHS,正是专为氨基标记而优化的正交偶联试剂。CAS号为1335880-13-7,分子式C₃₃H₄₁N₃O₇,分子量约591.70。
NHS酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯)是该分子的"氨基捕获器"。NHS酯能在pH 7.2至8.5的弱碱性条件下,与伯胺基团(如赖氨酸ε-氨基或蛋白质N端α-氨基)发生高效的酰胺化反应,形成稳定的酰胺键。这一反应的选择性*高——在生理pH下,NHS酯对氨基的反应速率比对羟基快1000倍以上,几乎不与其他官能团发生副反应。
PEG4链段在此扮演着"柔性间隔臂"的角色。四个乙二醇单元(约17.6 Å的长度)为DBCO与标记蛋白之间提供了适度的空间距离。这一设计绝非可有可无:当DBCO被用于后续的SPAAC点击反应时,PEG4的柔性可有效减少空间位阻,使DBCO基团能自由旋转并与叠氮基团高效接近。研究表明,相较于无PEG间隔的DBCO-NHS,DBCO-PEG4-NHS的点击反应效率提升约2至3倍。
DBCO端则赋予了该分子"二次偶联"的能力。在完成NHS酯对蛋白氨基的标记后,蛋白质表面便被引入了DBCO基团。随后,研究者可利用任何叠氮化的功能分子——如叠氮化荧光染料、叠氮化生物素或叠氮化多肽——通过SPAAC反应进行第二次标记。这种"NHS标记→SPAAC再标记"的两步策略,使该试剂成为构建多功能偶联物的通用平台。
在蛋白质组学的定量分析中,DBCO-PEG4-NHS Ester被广泛用于代谢标记实验。研究者可将该试剂与叠氮化的同位素标签(如¹⁵N标记的叠氮化合物)配合使用:先用DBCO-PEG4-NHS标记蛋白质的氨基,再通过SPAAC引入同位素标签,最终通过质谱分析实现蛋白质的相对定量。
从合成角度看,该化合物由DBCO-PEG4-COOH与NHS在EDC/DMAP催化下反应获得。关键控制点在于NHS酯的活性——过度活化会导致副产物增加,活化不足则偶联效率低下。*优反应条件为:EDC与NHS摩尔比1:1.2,反应温度25℃,反应时间2小时。纯化采用硅胶柱色谱,以DCM/MeOH(95:5)为洗脱剂,纯度可达95%以上。
储存需在-20℃避光干燥条件下,NHS酯对水分极为敏感,一旦接触水汽便会水解为无活性的羧酸。因此,开封后应在干燥器中操作,溶液建议现配现用。作为一款面向氨基标记的正交偶联试剂,DBCO-PEG4-NHS Ester为蛋白质化学、代谢标记与生物正交化学研究提供了高效而可靠的分子工具。

产地:西安
供应商:西安球赛在线直播平台 生物科技有限公司
纯度:99%
用途:仅用于科研
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!
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西安球赛在线直播平台 生物科技有限公司是一家从事原料药、MOF,离子液体 ,PEG衍生物、科研试剂、多肽、光电材料、碳纳米管、纳米材料、脂质体、合成磷脂的研发、定制合成、生产和销售的高科技生物科技有限公司。
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